Vattenbadet är för närvarande standard för upptining av cellinjer. Det finns i de flesta laboratorier och är alltid uppvärmt till 37 °C. Flexibiliteten att använda många olika laboratoriekärl, inklusive större flaskor, är obestridlig. Men det har också vissa nackdelar för användaren och cellerna. Kontinuerlig drift av vattenbadet, ofta med locket öppet, eftersom stora kärl värms upp med mediet, leder till hög energiförbrukning. Dessutom är användningen av kemikalier för att desinficera vattnet kontroversiell. Om dessa inte används finns det dock en risk för kontaminering. Vattenstänk vid insättning och borttagning av kärl kan på så sätt kontaminera andra kärl. Varje kärl blir blött och måste torkas och desinficeras innan det kan användas i sterilbänken. Användarens händer kan också bli våta och måste torkas och desinficeras ordentligt. Handskar ska bytas efter borttagning av kärl. Dessutom är det dyrt att rengöra ett vattenbad. Under denna tid kan det inte användas. Beroende på modell är den efterföljande uppvärmningstiden några minuter till en timme eller längre.

Vi jämförde de två metoderna för upptining i vattenbad och i Eppendorf SmartBlock™ cryo thaw med olika cellinjer och presenterade resultaten i resultatblad. HEK293-, CHO-K1-, S16-, episomala humana iPSC- och mono-alleliska mEGFP-märkta TOMM20 WTC hiPSC-celler användes. Alla tester visade jämförbar eller bättre cellviabilitet än vattenbadet efter upptiningsprocessen. Avvikelserna från medelvärdet för cellviabiliteten var oftast lägre vid användning av SmartBlock cryo-tining än vid användning av vattenbadet. När det gäller mono-alleliska mEGFP-märkta TOMM20 WTC hiPS-celler kunde pluripotens också påvisas efter 4 lyckade passager efter upptiningsprocessen i Eppendorf ^{ThermoMixer®} C med Eppendorf SmartBlock cryo thaw.

Det optimerade upptiningsprogrammet för Eppendorf ThermoMixer C med SmartBlock cryo-tining tinar 1-2 ml celler som frysts vid -80 °C inom 3-4 minuter med upp till 100% cellviabilitet med minimala skakrörelser (500 rpm). Programmet är reproducerbart, utsätts inte för temperaturfluktuationer och är energimässigt fördelaktigt på grund av den totala hastigheten. Risken för kontaminering minimeras eftersom varje rör tinas torrt i sin egen brunn. Eppendorf SmartBlock cryo thaw gör det möjligt att använda upp till 24 kryokärl samtidigt. På så sätt kan flera användare på ett säkert sätt tina sina celler samtidigt. Dessutom kan ThermoTop™ användas för att värma proverna ovanifrån för att undvika kondens. På så sätt förblir koncentrationen av ingredienser i mediet densamma.

Om det behövs kan SmartBlock Cryo-tiningen rengöras mycket enkelt med desinfektionsmedel och efter några minuter är den redo att användas igen.

Mediet kan överföras till koniska rör på 15, 25 eller 50 ml och värmas i ett lämpligt termoblock. Detta innebär att endast den mängd som faktiskt behövs tinas upp. Risken för kontaminering minskar också här jämfört med om hela flaskan används och mindre medium måste kasseras.

Sammanfattningsvis kan man säga att reproducerbar, ren upptining av medium och celler med utmärkt cellviabilitet i en termomixer är möjlig och rekommenderas. Det förenklar och påskyndar det dagliga laboratoriearbetet.